怎样检测饮用水中的大肠菌群？

(一)水样的采集

自来水取样：应在水龙头打开放水5分钟，再用无菌容器接取水样，待分析。如水样内含有余氯，则采样瓶灭菌后按每五百毫升水样加百分之三Na2S2O3.5H2O溶液一毫升。

(二)初发酵试验

1.水样稀释：制备水样10-1、10-2的稀释液，方法为用无菌移液管吸取水样10mL放于盛有90mL无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中，充分振荡使混合均匀，并使其中的细菌尽量呈单个存在，即为10-1稀释液;再从10-1制备10-2稀释液

2.接种和培养：以无菌操作于5支三倍浓缩培养基中各加入水样10mL，5支普通培养基试管中加入水样1mL，5支普通培养基试管中加入10-1稀释液1mL，小心混匀放入37℃培养箱中培养24h。此即5管法。

3.结果观察：37℃中培养24h后取出观察，观察有无气体和酸产生。在48h之间，培养管内倒置的杜汉氏小管内有任何量的气体积累，天津河水检测设备，或培养基颜色从紫色变为黄色，便可初步断定为阳性反应。

总大肠菌群细菌主要由以下4个菌属细菌组成：埃希氏菌属、柠檬酸菌属、克雷伯菌属和肠杆菌属。这些菌属可以在人、畜粪便中检出，有的也可以在营养丰富的水体中检出，即非粪便污染的情况下，也有检出这些细菌的可能性。粪大肠菌群组成与总大肠菌群组成相同，但主要组成是埃希菌属，在此菌属中与人类生活密切相关的仅有一个种，即大肠埃希氏菌；柠檬酸菌属、克雷伯菌属和肠杆菌属所占数量较少。

作为粪便污染的指示菌，大肠埃希氏菌检出的意义大，其次是粪大肠菌群，总大肠菌群的检出意义略差一些， 固定底物技术酶底物法操作简便，检测时间短，可在24小时内同时检测水中大肠菌群和大肠埃希氏菌的污染状况且无需确认试验；减少了传统方法中人为操作的误差，能够更准确地判断水样的微生物污染状况；作为国家饮用水卫生标准的新方法，不但可以用于水样的例行检测，更可作为应急突发事件的必备试剂。

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